人组蛋白脱基酶8(HDAC8)ELISA试剂盒说明书
英文名称:Histone acetyl enzyme off 8 (HDAC8) ELISA kit
性状:盒装液体
贮藏条件:2-8℃低温保存
注意要点:请仔细阅读产品的详细使用说明,严格遵照规定操作,必能得出准确的结果。
用途:科研与实验X试剂,不得用于临床诊断。
人组蛋白脱基酶8(HDAC8)ELISA试剂盒说明书 标本要求:
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
3.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可向客服索取说明书
4.加样:分别设X孔(X对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中 先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品X终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
5.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
6.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。
7.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
8.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,X孔除外。
9.温育:操作同3。
10.洗涤:操作同5。
11.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟。
12. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
13. 测定:以X空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
人组蛋白脱基酶8(HDAC8)ELISA试剂盒说明书 组成及试剂配制:
1、酶联板(Assay plate ):一块(96孔或者48孔)。
2、标准品(Standard):2瓶(冻干品)。
3、样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10、终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
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