上海恒远生物科技有限公司
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【产品名称】：小鼠热休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)ELISA试剂盒
【检测方法】：酶联免疫法/酶免法(ELISA)
【产品性状】：96T/48T，盒装液体
【贮藏】：2-8°C
【有效期】：Elisa试剂盒二年，我公司Elisa试剂盒均为X新批次，可放心购买。
【主要成分】：酶标板,试剂,标准品等。
【标本】：血清/血浆/细胞培养上清液/组织匀浆/组织液/尿液/分泌物
【质量承诺】：我们坚持对产品质量作不断的评估、创新和改善以确保您对我们产品的高度信任。
【待检样本】：体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆、心房水标本等
【样品采集】：Elisa试剂盒收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本，储存在4℃备用，如有特殊原因需要周期收集标本，将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。避免反复冻融。标本2-8℃可保存48小时，-20℃可保存1个月。-70℃可保存6个月。部分激素类标本需添加抑肽酶。
【保质期】：半年(六个月)
一、实验原理：
Elisa试剂盒原理
ELISA是以免疫学反应为基础，将抗原、牽9体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。由于抗原、抗体的反应在一种固相载体──聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行，每加入一种试剂孵育后，可通过洗涤除去多余的游离反应物，从而保证试验结果的特异性与稳定性。在实际应用中，通过不同的设计，具体的方法步骤可有多种。即:用于检测抗体的间接法(图a)、用于检测抗原的双抗体夹心法(图b)以及用于检测小分子抗原或半抗原的抗原竞争法等等。比较常用的是ELISA双抗体夹心法及ELISA间接法。
二、实验过程：
1.试剂准备：所有试剂都必须在使用前达到室温，使用后请立即按照说明书要求保存试剂。实验操作中请使用一次性的吸头，避免交叉污染。
2.加样：加样或加试剂时，请注意在吸取标本/标准品，酶结合物或底物时，X一个孔与X后一个孔加样之间的时间间隔如果太大，将会导致不同的“预孵育"时间，从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。一次加样时间(包括标准品及所有样品)X好控制在10分钟内，如标本数量多，推荐使用多道移液器加样。
3.孵育：为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标板加上盖或覆膜，以避免液体蒸发；洗板后应尽快进行下步操作，任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态;同时应严格遵守给定的孵育时间和温度。
4.洗涤：洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干，勿将滤纸直接放入反应孔中吸水，同时要消除板底残留的液体和手指印，避免影响X后的酶标仪读数。
三、ELISA注意事项
1.当混合蛋白溶液时应尽量轻缓，避免起泡。
2.洗涤过程非常重要，不充分的洗涤易造成假阳性。
3.一次加样时间X好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4.请每次测定的同时做标准曲线，X好做复孔。
5.如标本中待测物质含量过高，请先稀释后再测定，计算时请X后乘以稀释倍数。
6.在配制标准品、检测溶液工作液时，请以相应的稀释液配制，不能混淆。
7.底物请避光保存。
8.不要用其它生产厂家的试剂替换试剂盒中的试剂。
四、小鼠热休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)ELISA试剂盒X点：
我司共有14000余种ELISA试剂盒物种涵盖Human,Mouse,Rat等，畅销品种具备以下X点：
极高品质—高品质的抗体和试剂是ELISA试剂盒的基础
X特异—特异检测目标分子，结果X可重复
高度灵敏—可检测到pg/mLX别的目标
种类齐全—可覆盖人、大鼠、小鼠、棉鼠、猕猴、猪、马、犬和猫等多个种属
X化设计—可拆卸式96孔板(12X8)，为血清、血浆、尿样和细胞培养物样本检测进行X化
五、常见问题解答
小编简单整理了5个问题，具体内容如下：
1、一个ELISA试剂盒检测几个样品？
小编自己在各大论坛看到X多的三个答案：
1）48T可做42个样本加6个标准曲线；96T可做90个样本加6个标准曲线
2）以96T试剂盒来算，定量的试剂盒一般可以做90个左右的样品，定性的试剂盒可以做94个左右的样品
3）96T的ELISA试剂盒，去除标准品复孔检测，X多还能检测80个标本；48T的X多30个样本。
2、elisa试剂盒96T的能做检测多少血清样品？板能重复利用吗？
96T，一般做复孔的话，做标准曲线需要16个孔，剩下80个孔就可以做40个样本。这个板不能重复利用。而且配套的试剂也只是够一块板子用的。
3、想请教一下，我想用elisa法测血清里的一种抗原，查了资料，发现没有现成的试剂盒用，现在就有2种备选方案，一种是买抗体对自己包被（查了R&D等大公司都没有可用于elisa的单抗）。哪种比较好呢？自己包被的会不会比国产的试剂盒可靠呢？
如果你觉得技术不错有队其他公司不放心，可以自己购买抗体对自己包被，这个就是麻烦点，自己包被用着放心，舒心；
另外国内还是有一些资质不错的公司，如上海恒远，上海劲马，上海沪鼎等等
4、western和ELISA处理样本有何差别？
WesternBlot样品制备要加蛋白裂解液（含有蛋白酶抑制剂），然后冰上研磨，收集于EP管，冰上裂解30min，4度12000rpm离心15min，取上清分装，即得到蛋白样品。建议直接电泳，多余的-80保存。建议分装的蛋白每支略多于一次上样量，一次性用完一支，避免反复冻融。
ELISA样品，直接脑组织冰上匀浆，收集于EP管，同上一样离心，大约220-250ul每支分装（因为ELISA上样量基本都是每孔100ul，做复孔，每个样品2孔，就需要200ul，为了避免不够2孔，分装时要大于200ul每支），直接实验。多余的-80保存，一样避免反复冻融。
不过ELISAX好少量样品进行预实验，或者查阅文献，看看大概组织里有多高浓度，选择合适的试剂盒，测量范围要与组织浓度相符。避免浓度过高测量不准，或者浓度过低，小于试剂盒X低可测浓度。
5、小鼠热休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)ELISA试剂盒该买哪家公司的呢？
提出这个问题的朋友其实该打，目前国际上各个品牌的试剂盒生厂商，都会有其偏重点，像R&D在细胞因子方面的试剂盒就非常牛逼，而其他牌子也一样的。
Bender：粘附分子方面的试剂盒；
Cayman：花生四烯酸类产品的试剂盒；
Merck(Linco)：内分泌研究方面的试剂盒；
Tips：
1、买Elisa试剂盒时，尽量先查文献，通过文献找品牌，再找供应商，找供应商就找正规代理商，千万不要去干“赔夫人又折兵”的蠢事。
2、ELISA中，复孔就是同一个样品加到至少两个孔中（一般3个或4个），X后取其平均值作为样品的读数，这样测得的结果才有说服力！
做复孔是为了较好的较少组内差异，如果血清不足不做复孔也可以。
