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测定意义：果胶酶（pectinase）是一类分解果胶质酶类的总称，包括原果胶酶，果胶酯酶，多聚半乳糖醛酸酶和果胶裂解酶四大类，广泛存在于植物果实和微生物中，主要用于食品、酿酒、环保、医药、纺织及日化用品行业。
测定意义：果胶酶水解果胶生成半乳糖醛酸，具有还原性醛基，与 DNS 试剂反应生成红棕色物质，在540nm 有特征吸收峰，测定 540nm 处吸光值变化可计算得果胶酶活性。
自备实验用品及仪器：天平、低温离心机、可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿、恒温水浴锅。
产品说明： 果胶酶（pectinase）是分解果胶的酶类，包括原果胶酶，果胶酯酶，多聚半乳糖醛酸酶和果胶裂解酶四大类， 广泛存在于高等植物果实和微生物中，是水果加工中X重要的酶。
注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者 增加样本量进行检测。
样本处理
1、组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液） 进行冰浴匀浆，然后 10000g，4℃，离心 10min，取上清置于冰上待测。
2、菌类：按照细菌数量（10 4个）：提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细菌加入 1mL 提 取液），冰浴X声波破碎细菌（功率 300w，X声 3 秒，间隔 7 秒，总时间 3min）；然后 10000g，4℃，离心 10min， 取上清置于冰上待测。
3、液体：直接检测。
果胶酶活性计算
1、 标准曲线的绘制： 以各个标准溶液的浓度为 x 轴，其对应的△A 标准为 y 轴，绘制标准曲线，得到标准方程 y=kx+b，将ΔA 带 入方程得到 x（μmol/mL）。
2、 果胶酶活性的计算： （1）按蛋白浓度计算 酶活定义：在 50℃，pH3.5 条件下，每毫克蛋白每小时分解果胶产生 1μmol 半乳糖醛酸为 1 个酶活力单位。 果胶酶活性（U/mg prot）=x×V 提取÷（V 提取×Cpr）÷T= 2x÷Cpr （2）按样本质量计算 酶活定义：在 50℃，pH3.5 条件下，每克样本每小时分解果胶产生 1μmol 半乳糖醛酸为 1 个酶活力单位。 果胶酶活性（U/g 质量）= x×V 提取÷W÷T=2x÷W （3）按照细菌数量计算 酶活定义：在 50℃，pH3.5 条件下，每 10 4个细菌每小时分解果胶产生 1μmol 半乳糖醛酸为 1 个酶活力单位。 果胶酶活性（U/10 4 cell）= x×V 提取÷T÷细菌数量（万个）=2x÷细菌数量（万个） （4）按液体体积计算 酶活定义：在 50℃，pH3.5 条件下，每 mL 样本每小时分解果胶产生 1μmol 半乳糖醛酸为 1 个酶活力单位。 果胶酶活性（U/mL）= x×V 样÷V 样÷T= 2x V 提取：提取液体积，1mL； V 样：加入的样本体积，0.125mL；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；W：样本质 量，g；T：反应时间：0.5h。
