上海仁捷生物科技有限公司
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测定意义：β-GAL(EC 3.2.1.23)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，能够催化β半乳糖苷化合物中β半乳糖苷键水解，此外还具有转半乳糖苷的作用。β-GAL不仅可为植物的快速生长释放储存的能量，还能在正常的多糖代谢、细胞壁组分代谢以及衰老时细胞壁降解过程中催化多糖、糖蛋白以及半乳糖脂末端半乳糖残基的水解，释放自由的半乳糖。
测定原理：β-GAL 分解对-xiao基苯-β-D-吡喃半乳糖苷生成对-xiao基苯酚，后者在400nm 有X大吸收峰，通过测定吸光值升高速率来计算β-GAL 活性。
自备用品：可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者 增加样本量进行检测。
样本处理
1、 细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（10 4 个）：提取液体 积（mL）为500~1000：1 的比例（建议500 万细菌或细胞加入1mL 提取液），X声波破碎细菌或细胞（冰浴， 功率20％或200W，X声3s，间隔10s，重复30 次）；15000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2、 组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10 的比例（建议称取约0.1g 组织，加入1mL 提取液）， 进行冰浴匀浆。15000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
