上海一基实业有限公司
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产品说明
本产品直接以血液为模板，用抗抑制的2×Direct PCR Master Mix进行扩增，扩增产物直接通过电泳检测。
产品特点
1.简便：无需事先对血样进行提纯，直接用血液为模板扩增目的基因；
2.高效：多数抗凝剂存在条件下，X强的抗抑制能力，能X扩增杂质较多的模板。
适用范围
1.EDTA、肝素、柠檬酸钠抗凝方法保存的新鲜或冷冻血样；
2.未加抗凝剂的血样和干血；
3.血液基因组的扩增检测。
产品介绍
本试剂盒以血液为模板直接进行DNA扩增，扩增产物可直接点样电泳。该试剂盒中含有新设计的Taq酶突变体，这些使它能够耐受全血样品中存在的抑制剂。在大多数抗凝剂存在下，包括肝素、柠檬酸和EDTA等，Taq酶依然扩增性能良好。由于其可以从血液直接进行扩增，免除了繁琐的DNA提取步骤，加快了工作流程，降低了污染的风险。
产品特点
1.简便：无需事先对血液进行提纯，直接用血液为模板扩增目的基因；
2.高效：多数抗凝剂存在条件下，X强的抗抑制能力，能X扩增杂质较多的模板。
产品用途
1.未加抗凝剂的血液样本；
2.添加了肝素、柠檬酸、EDTA 等抗凝剂的血液样本；
3.血液基因组扩增检测。
使用建议
1.使用时添加≤10%的全血为模板，若扩增不出目的条带， 酶量可加倍。加上血液后将管中各组分轻轻混匀。
2.2mM Mg2+可以满足绝大多数PCR扩增，对于某些PCR，为了保证较好的扩增，可调
节为2-5mM。
保存温度
-20℃保存。
产品组分
产品组成 | 体积 |
2 ×DirectBlood PCRBuffer（with Mg2+） | 1.25ml |
dNTPs（各10mM） | 100μl |
Direct Taq DNA聚合酶（400U） | 100μl |
使用方法
常用反应体系(25μl):
2 × Direct Blood PCR Buffer （with Mg2+*） | 10μl |
上游引物 | 0.2-1.0 μM（终浓度） |
下游引物 | 0.2-1.0 μM （终浓度） |
dNTPs（各10mM） | 1μl |
全血 | 0.1-2.5μl |
Direct Taq DNA 聚合酶（400U） | 1μl |
ddH2O | 至25μl |
*Mg2+终浓度为3.5mM
常用PCR设置
当扩增片段＜3K | 当扩增片≥（推荐引物长度≥30bp） |
94℃， 1 分钟 30 秒 94℃，20 秒 55-60℃，20 秒 30-40循环 72℃，1kb/60 秒 72℃ 5 分钟 4℃ 保温 | 94℃， 5 分钟 94℃，15 秒 30-40循环 68℃，1kb/60 秒 72℃ 5 分钟 4℃ 保温 |
